对AM菌根真菌的研究首先是从土壤的采集开始的，一般采集根际0_30<：111处的土壤、根 系混合样品1500g左右• 土壤风千后装入塑料袋中，标好标签，记录好采集地点、气候、植 被、宿主及附近植物。对AM菌根真菌孢子的收集和分析采用湿筛倾析法：首先，将土样混 匀，称取l〇〇g放入容器内，用清水浸泡2〇-30min。接着，用孔径80〇-55wm的土壤筛分层重 叠放置，小孔径在底层并使晒面适当倾斜。用玻璃棒搅匀土壤浸泡液，将上层的浸泡液慢慢 倒入最上—层的土壤筛内，用清水冲洗各晒面的筛出物，直到没有土壤颗粒为止。用洗瓶将 滞留的筛出物洗入干净的培养皿内，培养皿内除了土壤颗粒和一些杂质外就是AM菌根真菌 醜子，最后在題镜下馳子进行分离【51]。AM菌根颠孢子雛集和分馳可以采用密度 梯度法：顾名思义就是在离心管中用蔗糖和甘油等不同密度的物质组成不同的浓度梯度，使 得不同密度的AM菌根真菌的孢子分离在不同的界面上，以达到分离的目的。

观察AM菌根真菌侵染主要通过染色法，染料通常为曲利苯蓝和碱性品红，其中曲利苯 蓝染色稳定易于观察应用比较广泛。染色和观察的一般步骤为：首先将宿主植物根洗净用滤 纸吸千，均勻的把根段剪成lcm左右的根段，依宿主植物不同称取〇.3*〇.5g (约1〇〇条根段)。 将称好的根样装在特制的尼龙袋中浸泡在10%的氢氧化钠溶液中沸水浴25_35min以对根段经 行脱色。脱色完毕后，用清水洗清将样品浸泡在2%的盐酸溶液中酸化。酸化后洗净样品，将 样品浸泡在染色剂中（曲利苯蓝或者碱性品红）沸水浴40分钟进行染色•染色结束后，将根 段浸泡在甘油、水、乳酸比例为1:1:1的溶液中保存和脱色，I-2天后便可观察侵染情况。侵 染率的计算：将染色后的根段置于带有网格（网格边长km)的培养皿中并分散均匀，记录交 叉点上被侵染的根段（染为蓝色）占总根段的比例。侵染率（％)=被侵染的根段数Z总根段数 X100。侵染强度和丛枝丰度的计算：将染色后的根段置于培养皿中并分散，随机选取30条 根段放置在载玻片上，每15条用一张盖玻片滴加50%甘油覆盖并压片，在1〇〇倍400倍的显 微镜下观察，记录每条根段的侵染强度和丛枝丰度。侵染强度分为6个等级，根段丛枝丰度 分别4个等级[52]。

AM菌根真菌与宿主植物协同进化了数亿年，已经到了不能离开宿主植物独立生活繁殖的 地步，所以对于AM菌根真菌的扩繁都需要宿主植物的协助。目前，广泛应用的主要有一下 主要几种方法，单孢培养法：是把是筛法分离到的孢子经消毒后播种消毒的种子，34个月后 培养基中的孢子就从单个孢子发展出新一代的孢子，加富培养法：为了扩繁来自单孢分离培 养的纯系，将河沙消毒后加入培养盆，把含有孢子、孢子果、菌丝体和被侵染根段的来自担 孢培养的培养物混入河沙中，播种消毒后的种子。培养过程中施加Hoag丨and营养液，3个月 左右便可获得扩繁产物。